医薬

ご提供いただく資料を基に、指定の化合物の合成を順次行う。
各化合物の合成量の目標値は100 mgとする。

大腸菌においてHisタグ融合タンパク質を発現させるプラスミドベクターを構築する。それを大腸菌に導入し、組換えタンパク質を発現させ、Ni-NTAアフィニティクロマトグラフィにより、目的タンパク質の精製を行う。

哺乳類細胞において、組換え抗体 (IgG、Fab抗体、ScFv抗体、任意の人工デザイン抗体)を発現させるプラスミドベクターを構築する。それを293系またはCHO系細胞に導入し、組換えタンパク質を一過的に発現させ、最適発現条件の検討ならびに大量精製を行う。

コムギ胚芽無細胞系を用いて、任意のタンパク質群 (膜タンパク質ファミリー、転写因子ファミリー、ホモログタンパク質、点突然変異タンパク質群)から構成されたプロテインアレイを96/384-well plate 上に合成する。

指定された遺伝子のアミノ酸コード領域をcDNAからPCR増幅し、N末端にMyc-tagを付加した状態で哺乳類用発現ベクタープラスミドに挿入する。挿入配列を確認後、Mini-prepサイズのプラスミドを納品する。

遺伝子改変マウスと正常マウスの比較などうつ病や認知に関する行動解析試験を実施する。マウスを馴化後、防音室内のオープンフィールド用ケージにマウスを入れ、ビデオ撮影し、クレバーシス社のPhenoscanシステムにより解析する。

384-well plate上でタンパク質Aとタンパク質Bの相互作用をTR-FRET/AlphaScreenにより測定する系を設計し、その反応測定条件を最適化する。

任意のタンパク質との結合を検出するため、コムギ無細胞系を用いて384-well plate上で1,000種類のタンパク質を合成する。AlphaScreenを用いたタンパク質間相互作用測定系を構築し、結合タンパク質を同定する。

はじめに培養細胞を用いたin vitro試験で数十種類の人工核酸を作用させ、標的遺伝子のmRNA解析を実施し、ノックダウン効果が高いものを選別する。次にマウスを用いたをin vivo試験で、投与量、投与回数、期間を検討し、標的臓器における標的遺伝子のノックダウン効率および毒性を解析する。最適な投与条件を決定後、個体数を増やし、標的遺伝子のノックダウン効率とそれに伴う表現型を解析する。